Zařízení pro práci s Hoffmanovou modulovanou kontrastní metodou MAGUS HCM360, se sadou objektivů

Zařízení MAGUS HCM360 se skládá ze sady rovinných achromatických objektivů, kondenzoru a posuvníku, které jsou určeny pro Hoffmanovu modulovanou kontrastní mikroskopii. Modulátor objektivu se zarovná se štěrbinovými otvory posuvníku pomocí centrovacího teleskopu ze sady mikroskopu.

Technika Hoffmanovy modulované kontrastní metody vytváří reliéfní snímky živých objektů s vysokým rozlišením. Poskytuje dobrou viditelnost a kontrast vzorků s vysokým rozlišením detailů a bez difrakčních halo efektů, což umožňuje použití dlouhých pracovních vzdáleností a vysokých numerických apertur.
Tato technika nezhoršuje kvalitu obrazu při použití skleněných a plastových laboratorních misek, a proto se široce používá pro pozorování a fotografování kultur, buněk a tkání pěstovaných v kontejnerech, Petriho miskách a nádobách. Jednou z nejčastějších aplikací Hoffmanovy modulované kontrastní metody je oplodnění in vitro (IVF). Tato technika umožňuje studovat dynamické procesy v reálném čase a pomáhá získat cenné informace o chování a interakci buněk.

Sada objektivů

Hoffmanovy objektivy se od standardních objektivů liší tím, že mají v zadní ohniskové rovině amplitudový prostorový filtr (modulátor). Modulátor má tři zóny: první propouští 1 % světla (tmavá zóna), druhá 15 % (šedá zóna) a třetí 100 % (průhledná zóna). Kroužek na Hoffmanově objektivu slouží k otáčení modulátoru a jeho nastavení do pracovní polohy.

Na rozdíl od fázového kroužku ve fázovém objektivu modulátor v Hoffmanově objektivu nemění fázi světla, ale ovlivňuje pouze jeho intenzitu. Modulátor vytváří obraz s efektem pseudoreliéfu.

Hoffmanovy rovinné achromatické objektivy vytvářejí obraz, který má stejné ohnisko ve středu i na okrajích, a proto je zkreslení zanedbatelné. Chromatická aberace je korigována pro modré a červené, sférická aberace pro zelené světlo a zakřivení pole je korigováno na 90 % průměru zorného pole. Objektivy lze použít pro práci s miskami o tloušťce dna 1,2 mm a jsou určeny pro délku tubusu s korekcí na nekonečno. Parfokální vzdálenost je 60 mm.

Hoffmanův kondenzor

Hoffmanův kondenzor se instaluje namísto běžného kondenzoru pro světlé pole. Má štěrbinu pro posuvník Hoffmanova modulovaného kontrastu, clonu a polarizátor pro ovládání otevření štěrbiny. Polarizátor je otočný o 360°. Otáčí se pomocí otočného kroužku umístěného nad ovladačem otevření clony.

Hoffmanův posuvník

Hoffmanův posuvník se vkládá do štěrbiny Hoffmanova kondenzoru. Posuvník je destička se třemi kruhovými vložkami pro objektivy 10x, 20x a 40x. Označení vložky odpovídá použitému objektivu. V každé vložce jsou dva otvory: jeden je volný a druhý je uzavřen polarizátorem. Vložky v posuvníku jsou otočné o 360° a lze je vycentrovat.

Nastavení mikroskopu tak, aby umožňoval použití Hoffmanovy modulované kontrastní techniky:

1. Na mikroskopu je nainstalován Hoffmanův kondenzor a objektivy.
2. Objektiv v optické dráze je zaměřen na vzorek v jasném poli.
3. Hoffmanův posuvník se vloží do štěrbiny kondenzoru a vložka se vybere podle zvětšení objektivu. Otvor kondenzoru musí být zcela otevřený.
4. Jeden z okulárů je vyjmut z hlavy mikroskopu a nahrazen centrovacím teleskopem ze sady mikroskopu. Teleskop se používá k zarovnání modulátoru objektivu se štěrbinami posuvníku. Modulační zóny a štěrbiny musí být navzájem rovnoběžné, kdy je jedna ze štěrbin plně promítnuta do šedé zóny a druhá do průhledné zóny. Pokud pohyb kroužku nestačí k instalaci modulátoru do požadované polohy, vyjměte posuvník z kondenzoru, otočte vložku s drážkou, nainstalujte posuvník zpět do drážky a poté znovu proveďte nastavení.
5. Otáčením kondenzoru se zablokuje štěrbinový otvor v průhledné zóně: jeden může být zcela nebo částečně uzavřený nebo zcela otevřený.
6. Hoffmanův posuvník by měl být z kondenzoru odstraněn, abyste se mohli vrátit k technice jasného pole. Objektivy a kondenzor není nutné vyjímat, protože jsou vhodné pro pozorování v jasném poli. Pro dosažení nejlepší kvality obrazu v jasném poli však doporučujeme použít objektivy MAGUS 10PL60V, 20PL60V a 40PL60V a standardní kondenzor ze sady mikroskopu.

Kompatibilita:

• Biologický inverzní mikroskop MAGUS Bio V360

Obsah sady:

• Hoffmanův kondenzor MAGUS NA 0,5 WD 45 mm
• Hoffmanův rovinný achromatický objektiv s korekcí na nekonečno: 10x/0,25 ∞/1,2, parfokální vzdálenost: 60 mm
• Hoffmanův rovinný achromatický objektiv s korekcí na nekonečno: 20x/0,40 ∞/1,2, parfokální vzdálenost: 60 mm
• Hoffmanův rovinný achromatický objektiv s korekcí na nekonečno: 40x/0,60 ∞/1,2, parfokální vzdálenost: 60 mm
• Hoffmanův posuvník pro objektivy 10x, 20x a 40x